不同強(qiáng)度周期性壓力對組織工程軟骨的影響(47頁).rar
不同強(qiáng)度周期性壓力對組織工程軟骨的影響(47頁),中文摘要目的:在周期性壓力環(huán)境下進(jìn)行組織工程軟骨的體外構(gòu)建，探討不同強(qiáng)度的周期性壓力對組織工程軟骨構(gòu)建的影響。方法:處死出生3一5天新西蘭兔4只，酒精浸泡消毒后取四膚關(guān)節(jié)軟骨。將軟骨剪碎至約1~“大小，用0.25%的胰蛋白酶和0.2%的h型膠原酶依次消化后獲取軟骨細(xì)胞。體外擴(kuò)增培養(yǎng)至第二代后，收集細(xì)胞。將軟骨細(xì)胞分別接...
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中文摘要
目的:
在周期性壓力環(huán)境下進(jìn)行組織工程軟骨的體外構(gòu)建，探討不同強(qiáng)
度的周期性壓力對組織工程軟骨構(gòu)建的影響。
方法:
處死出生3一5天新西蘭兔4只，酒精浸泡消毒后取四膚關(guān)節(jié)軟骨。
將軟骨剪碎至約1~“大小，用0.25%的胰蛋白酶和0.2%的H型膠原
酶依次消化后獲取軟骨細(xì)胞。體外擴(kuò)增培養(yǎng)至第二代后，收集細(xì)胞。
將軟骨細(xì)胞分別接種于smm巧mm大小的PLGA無紡網(wǎng)支架，待細(xì)胞
充分貼壁后，隨機(jī)分為四組，每組10個(gè)支架。其中三組為實(shí)驗(yàn)組，置
于由資B一40型旋轉(zhuǎn)式生物反應(yīng)器和往復(fù)式加壓泵組成的“周期性加壓
培養(yǎng)系統(tǒng)”內(nèi)培養(yǎng)，分別施加強(qiáng)度為0一50KPa、0一100勒a、O一ZooKPa，
頻率0.1比的周期性壓力，另一組不加壓，為對照組。所有細(xì)胞一支架復(fù)
合物培養(yǎng)2周后，肉眼觀察所獲組織工程軟骨的外觀，HE染色觀察
各組軟骨細(xì)胞的形態(tài)及分布，甲苯胺藍(lán)染色觀察各組軟骨細(xì)胞糖氨多
糖(GAG)分泌，11型膠原免疫組織化學(xué)染色方法觀察各組軟骨細(xì)胞
11型膠原分泌，檢側(cè)三組周期性壓力組和對照組的組織工程軟骨11型
膠原和糖氨多糖(GAG)含量。
結(jié)果:
20OKPa組工程軟骨體積最大，最厚，表面光滑，有光澤，彈性好。
H衛(wèi)染色可見軟骨細(xì)胞增殖最旺盛，排列緊密，分布均勻，細(xì)胞被大量
EcM包圍，融合成片，可見軟骨陷窩。甲苯胺藍(lán)染色可見切片紫藍(lán)著
色，顏色很深，質(zhì)地較密，分布均勻。11型膠原免疫組織化學(xué)染色陽
性顯色，呈棕黃色，采用圖像分析系統(tǒng)對棕黃色染色面積計(jì)數(shù)，H型
膠原免疫組織化學(xué)染色可見11型膠原染色面積百分比最高
(52.44士1.87%，p<0.01)，GAG含量最高(476.33士25.66協(xié)g，p<0.01)。
100KPa組和50KPa組次之。對照組組織工程軟骨體積較小，厚度較薄，
表面欠光整，質(zhì)軟，彈性差。HE染色可見細(xì)胞分布散亂，ECM較少，
未融合成片。甲苯胺藍(lán)染色可見著色較淺，分布不均。11型膠原染色
面積百分比最低(41.05士6.28%，P<0.01)，GAG含量最低
(220.00士12.14林g，P<0.01)。
結(jié)論:
組織工程軟骨細(xì)胞增殖和合成11型膠原、GAG受周期性壓力強(qiáng)
度的調(diào)控，其中頻率0.IHz、強(qiáng)度200KPa的周期性壓力能更好地促進(jìn)
軟骨細(xì)胞增殖，合成11型膠原、GAG等細(xì)胞外基質(zhì)。
關(guān)鍵詞:軟骨細(xì)胞;壓力;強(qiáng)度;組織工程
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目的:
在周期性壓力環(huán)境下進(jìn)行組織工程軟骨的體外構(gòu)建，探討不同強(qiáng)
度的周期性壓力對組織工程軟骨構(gòu)建的影響。
方法:
處死出生3一5天新西蘭兔4只，酒精浸泡消毒后取四膚關(guān)節(jié)軟骨。
將軟骨剪碎至約1~“大小，用0.25%的胰蛋白酶和0.2%的H型膠原
酶依次消化后獲取軟骨細(xì)胞。體外擴(kuò)增培養(yǎng)至第二代后，收集細(xì)胞。
將軟骨細(xì)胞分別接種于smm巧mm大小的PLGA無紡網(wǎng)支架，待細(xì)胞
充分貼壁后，隨機(jī)分為四組，每組10個(gè)支架。其中三組為實(shí)驗(yàn)組，置
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培養(yǎng)系統(tǒng)”內(nèi)培養(yǎng)，分別施加強(qiáng)度為0一50KPa、0一100勒a、O一ZooKPa，
頻率0.1比的周期性壓力，另一組不加壓，為對照組。所有細(xì)胞一支架復(fù)
合物培養(yǎng)2周后，肉眼觀察所獲組織工程軟骨的外觀，HE染色觀察
各組軟骨細(xì)胞的形態(tài)及分布，甲苯胺藍(lán)染色觀察各組軟骨細(xì)胞糖氨多
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11型膠原分泌，檢側(cè)三組周期性壓力組和對照組的組織工程軟骨11型
膠原和糖氨多糖(GAG)含量。
結(jié)果:
20OKPa組工程軟骨體積最大，最厚，表面光滑，有光澤，彈性好。
H衛(wèi)染色可見軟骨細(xì)胞增殖最旺盛，排列緊密，分布均勻，細(xì)胞被大量
EcM包圍，融合成片，可見軟骨陷窩。甲苯胺藍(lán)染色可見切片紫藍(lán)著
色，顏色很深，質(zhì)地較密，分布均勻。11型膠原免疫組織化學(xué)染色陽
性顯色，呈棕黃色，采用圖像分析系統(tǒng)對棕黃色染色面積計(jì)數(shù)，H型
膠原免疫組織化學(xué)染色可見11型膠原染色面積百分比最高
(52.44士1.87%，p<0.01)，GAG含量最高(476.33士25.66協(xié)g，p<0.01)。
100KPa組和50KPa組次之。對照組組織工程軟骨體積較小，厚度較薄，
表面欠光整，質(zhì)軟，彈性差。HE染色可見細(xì)胞分布散亂，ECM較少，
未融合成片。甲苯胺藍(lán)染色可見著色較淺，分布不均。11型膠原染色
面積百分比最低(41.05士6.28%，P<0.01)，GAG含量最低
(220.00士12.14林g，P<0.01)。
結(jié)論:
組織工程軟骨細(xì)胞增殖和合成11型膠原、GAG受周期性壓力強(qiáng)
度的調(diào)控，其中頻率0.IHz、強(qiáng)度200KPa的周期性壓力能更好地促進(jìn)
軟骨細(xì)胞增殖，合成11型膠原、GAG等細(xì)胞外基質(zhì)。
關(guān)鍵詞:軟骨細(xì)胞;壓力;強(qiáng)度;組織工程
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